潔凈室質(zhì)量控制及其檢測方面的討論

關(guān)鍵詞：潔凈室 質(zhì)控標準 檢測 空氣微生物 懸浮粒子 制藥 生物制品 

　　潔凈室對于制藥工業(yè)的重要意義已為人們肯定全會精神。生物制品 是制 藥工業(yè)的一部分提供有力支撐，對生產(chǎn)廠房有很高的潔凈要求［1結論，2］。Gilland等曾在市售的 嗜酸乳桿菌產(chǎn)品中高質量，分離到人為污染的短乳桿菌研究與應用、發(fā)酵乳桿菌和植物乳桿菌等［3］ 。生物制品生產(chǎn)中迎難而上，尤其是活菌建設項目、活疫苗的生產(chǎn)中動手能力，經(jīng)常受到不同程度的污染服務品質，因此傳遞，不僅 需要重視潔凈室的建立，更要重視質(zhì)量控制方法及標準過程。

　　朝鮮戰(zhàn)爭中的發生，美國發(fā)現(xiàn)大量電子儀器失靈，zui后找到了主要原因進一步完善，是灰塵在作怪相結合，促成了潔 凈技術(shù)的起步。1961年影響，誕生了世界上zui早的潔凈室標準相關性，既美國*技術(shù)條令203，1963 年製高點項目，頒布了上zui的潔凈室標準：美國聯(lián)邦FS209的必然要求。1966年，頒布了修訂后209A物聯與互聯， 時至1992年狀況，建立了迄今被廣泛采用的209E。上為了加強藥品取得了一定進展、生物制品質(zhì)量管理規(guī)范 (GMP)業務，把潔凈室定為*的生產(chǎn)硬件之一。GMP對廠房有所增加、設(shè)備等完善好，明確規(guī)定了相應(yīng)的潔凈要 求，并制訂了有關(guān)標準讓人糾結。

　　1　潔凈室的污染源

　　潔凈室污染源按性質(zhì)可分物理不斷完善、化學(xué)、生物等自動化方案。直徑在0.001-1000μm的固態(tài)行動力、液態(tài)或二者 的混合物質(zhì)，包括生物粒子和非生物粒子空間廣闊，我們稱為懸浮粒子(airborne particles)落到實處。微生 物一般以無生命的粒子作載體而懸浮，以氣溶膠(Aerosol)形式存在于空氣中，1μm以下 者永外懸浮營造一處，10μm以上者會逐漸沉下來而形成菌塵。潔凈室污染可分為外部污染和內(nèi)部污 染線上線下。外部污染指大氣塵污染保供，可以通過光電法測得。內(nèi)部污染，是由人和有關(guān)的物品技術創新、設(shè)備 等引起的醒悟。人是潔凈室zui大的污染源，占90%左右生產體系。人和環(huán)境造成了潔凈室的污染新模式，所以在 潔凈室中，人的數(shù)量和活動應(yīng)有特別嚴格的限制高質量。一般男性每人每分鐘向周圍排放1000個以 上的含菌粒子應用情況，女性為750個以上。穿衣服時，靜止態(tài)發(fā)菌量為10-300個/min·人也逐步提升，行走時 的發(fā)菌量為900-2500個/min·人∧芰退?？人砸淮伟l(fā)菌量為70-700個/min·人組織了，噴嚏一次為400-60 0個/min·人［4，5］智能設備。

　　2　潔凈室質(zhì)控標準

表1　世界主要國家潔凈室標準(潔凈度)

　　 潔凈室是指空氣潔凈度達到規(guī)定要求的可供人類工作的場所 解決問題，其功能是控制微粒的污染 。一般按用途可分為：1.工業(yè)潔凈室不要畏懼，以無生命的微粒為控制對象導向作用；2.生物潔凈室，主要 控制微生物對工作對象的污染特點。

　　世界主要國家的潔凈室標準見表1［6，7］。美國是世界上zui早頒布潔凈室標準的 國家意見征詢，各國的潔凈室標準都是在美準的基礎(chǔ)上組成部分，結(jié)合各國的實際情況而制訂的，我國的 標準基本上參照美國聯(lián)邦標準和歐共體的標準而制訂的集聚。

　　3　潔凈室質(zhì)控的檢測方法及討論［8］

　　3.1　塵埃粒子　由于空氣中存在大量塵埃粒子高效化，而微生物大多依附于這些塵埃粒子隨空氣流動造成污染。制 藥工業(yè)用多種方法獲得無菌狀態(tài)新的動力，過濾法以其捕集率高完成的事情，又經(jīng)濟而被廣泛使用。其中為產業發展，特別 應(yīng)該提到的是采用了HEPA(High Eicienoy Particulate Air)過濾器研究成果，對0.3μm以上空氣 粒子捕集率高達99.97%以上，除濾過病毒外穩定，空氣中所有微生物顆翙C製性梗阻？杀粸V除齊全。因此， 正常潔凈室是無菌的改造層面，但是機製，由于人、物首次、環(huán)境等污染因素流動性，潔凈室往往受到不同程度 污染。因此生產效率，我們多采用激光塵埃粒子計數(shù)且進行監(jiān)控。標準見表2部署安排。

表2　外有關(guān)懸浮粒子的測定標準(塵粒數(shù)/m3)

　　3.2　空氣微生物　空氣中活微生物大多依附塵埃粒子而形成生物活性粒子競爭激烈。應(yīng)用細菌采樣器抽取一定量的空氣 使其滯留在培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)計數(shù)菌落數(shù)效果。早在現(xiàn)代微生物問世之前學習，人們就認為某些疾 病是由被稱為“瘴氣"的空氣污染而引起。20世紀30年代改善，英國研制porton液體采樣器，美 國研制了AGI液體采樣器。1941年發揮重要作用，Bourdion使用裂縫式采樣器自行開發，成為空氣微生物采樣測定 的開端。1956年取得顯著成效，報道了*個篩孔撞擊式采樣器處理方法，1958年A.A.Andersn對其加以改進并 定型生產(chǎn)，稱為安德森(Anderson)空氣微生物采樣器責任。它由頂罩服務、6節(jié)篩板、3個彈簧及抽氣 孔和動力裝置構(gòu)成持續向好。目前舉行，這種采樣器已發(fā)展到8級，并有許多改進型不容忽視。由于它采集粒譜廣 習慣、效率高、生物失活率低等原因而廣泛使用至今深入各系統〈笮?？諝馕⑸锊蓸悠饕话惴譃槠叽箢悾阂后w 式、固體式進一步推進、沉降式不可缺少、離心式系列、光散射式和大容量式。本文將對離心式空氣微生物采樣器(R CS)作詳細討論服務為一體》桨?？諝馕⑸餃y試標準見表3。

表3　外有關(guān)空氣微生物的測定標準(CFU/m3) 

　　3.3　表面微生物　為了檢測潔凈室中墻壁相互配合、地板統籌發展、儀器表面、桌 面積極回應、門把等帶菌情況慢體驗，通常選用接觸壓印法(Cortact)和棉拭法(Swabbing)等方法。需要時 全會精神，還可與過濾裝置相結(jié)合來完成棉拭采樣左右。1941年，Walter和Hvcker報道了COntact瓊脂平 板方法的過程中，以后物聯與互聯，Angelotti和Fotert等作了進一步的工作。帶菌狀況都有要求範圍和領域，歐共體GMP( 草案)規(guī)定取得了一定進展，100級：平均菌落數(shù)不可過5 個；1000級：25個；100000級：50個有所增加。表面微生物的檢測，越來越受到人們的重視國際要求。

　　3.4　關(guān)于沉降平皿(Settle plate)　1881年Kock創(chuàng)立紮實。依靠空氣中的粒子自然沉降于瓊脂平板上的這種采集方法，由于粒子沉降 的速率很慢新趨勢，如需采集到有效數(shù)量的粒子可能性更大，就需暴露很長時間。但因空氣中的致病菌數(shù)量是 很少的新體系，金黃色菌菌球菌在病房空氣中平均每140升才有一個活菌粒子使命責任，為了彌補這個 缺陷，曾采用直徑為14公分的大平皿搖籃，以增加瓊脂的暴露面積持續創新。Harding和Williams還曾用 一種多層平板的方法來進一步暴露面積，每層放一個14公分直徑的平板使用，但結(jié)果不堪滿意分析。

　　奧姆梁斯基曾試圖把采樣后平板上長出的菌落換算成一定體積空氣中的微生物含量，以便能 利用沉降平板法的采樣結(jié)果來測定空氣中的活菌濃度不難發現。為此合規意識，他設(shè)定了在100cm2營養(yǎng)瓊脂 上暴露5分鐘后聽得懂，培養(yǎng)長出的菌落，即相當(dāng)于10升空氣中的活菌數(shù)協調機製。由于懸浮在空氣中的含 菌粒子直徑不過100μm設備製造，這些小粒子在空氣中的沉降受空氣阻力的影響，其沉降速率遵循 上的Stokes公式高質量發展。根據(jù)這個公式資源配置，粒子的沉降速率與其大小成正比，但是攻堅克難，奧姆梁斯基 恰好忽略了這一點機遇與挑戰，因此，它是不能成立的利用好。例如參與水平，直徑1μm的含菌粒子，在5分鐘內(nèi)沉降 距離為1.05cm有望，大部分的粒子就沉降不到瓊脂表面上。

　　由于潔凈室已濾除了大部分大顆粒解決問題，一般用此法是無意義的服務效率。但是，人為導向作用、環(huán)境和潔凈裝置 故障等原因引起的較大顆粒污染以及沉降平板采樣潔的簡便蓬勃發展，可作為日常監(jiān)測潔凈室水平的 一種參考方法。

　　3.5　關(guān)于RCS［9］　離心式空氣采樣器(The Reuter Centrifugal Sampler,RCS)被介紹作為一種在使用的檢 測空氣微生物的儀器重要意義，由于它輕便問題，無噪音而廣泛使用，并擴展到制藥工業(yè)等領(lǐng)域效率。RCS通 過離心收集顆粒，為制藥工業(yè)所接受，因為它似乎符合FDA所描述的“Active"采樣儀器十大行動。 重要性。Gre-schel等認為它相當(dāng)有效，Macher等則持反對意見體系。多年來系統穩定性，許多者了帶菌 顆粒的大小，結(jié)論是：5-15μm多種場景，中等粒是13μm科技實力，而4μm以下很少。這些結(jié)果是從集中展示、手 術(shù)室可靠保障、辦公室規劃、實驗室和制藥無菌室所獲得。他們認為具有重要意義，如果顆粒大小是已知的前景，RCS可定 量測定細菌濃度，但是勃勃生機，目前這些顆粒大小是未知的效高化，故不能把它視為定量采樣器，只能歸 于沉降平皿一樣的類型反應能力。Delmore等發(fā)現(xiàn)部署安排，100級無菌室中，RCS/slit比率是2.1投入力度，即RCS是s lit采樣器微生物捕促率的210%有效效果。我國丁璽華等也仿制了RCS，選用國產(chǎn)元件技術，試制了LW C-1型離心式空氣采樣器改善。

　　雖然RCS有正反兩方面的爭議，但由于它有許多優(yōu)點結構重塑，并明顯優(yōu)于沉降平皿推廣開來，1986年，西方 近一半的制藥公司采用了RCS貢獻法治，作為空氣微生物采樣器密度增加，我國正在逐漸推廣。