1.目的：GMP潔凈區(qū)沉降菌測試方法及測試記錄表 闡述潔凈室空氣中沉降菌檢測操作規(guī)程利用好，保證藥品質量，防止生產(chǎn)環(huán)境對產(chǎn)品的污染講理論。

2.范圍：適用于本公司潔凈區(qū)(室)的沉降菌的監(jiān)測有望。

3.責任：沉降菌檢測員。

4.內容：GMP潔凈區(qū)沉降菌測試方法及測試記錄表

4.1基本概念：

4.1.1菌落:**培養(yǎng)后,由一個或幾個**繁殖而形成的一**集落,簡稱CFU.通常用個數(shù)表示解決問題。

4.1.2沉降菌：用GB/T16292-2010提及的方法收集空氣中的活性微生物粒子深刻內涵，通過專門的培養(yǎng)基在適宜的生長條件下繁殖到可見的菌落數(shù)。

4.1.3沉降菌菌落數(shù):規(guī)定時間內每個平板培養(yǎng)皿收集到空氣中沉降菌的數(shù)目最為突出，以個/皿表示逐步改善。

4.2測試原理:本測試方法利用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時間落實落細，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來評定潔凈環(huán)境內的活微生物數(shù)組成部分，并以此來評定潔凈區(qū)的潔凈度深入闡釋。

4.3測試方法：

4.3.1使用的儀器設備和培養(yǎng)基:

    高壓**鍋:使用時應嚴格按照操作規(guī)程進行。

    恒溫培養(yǎng)箱:必須定期對培養(yǎng)箱的溫度計進行檢定高效化。

    培養(yǎng)皿:一般采用φ90mm×15mm硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿大大提高。使用前將培養(yǎng)皿置于121℃濕熱**20min。

    培養(yǎng)基:胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基完成的事情。

將培養(yǎng)基加熱熔化調整推進，冷卻至約45℃在無菌操作條件下將培養(yǎng)基注入培養(yǎng)皿，每皿約15ml研究成果。待瓊脂培養(yǎng)基凝固后發展契機，將培養(yǎng)基平皿放入32℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72小時若培養(yǎng)基平皿上確無菌落生長即可供采樣用，制備好的培養(yǎng)基平皿應在2-8℃的壞境中存放兩個角度入手。

4.3.2測試時間:

    對單向流關註點，如*凈化房間內及層流工作臺廣泛認同，測試應在凈化空調系統(tǒng)正常運行不少于10分鐘后開始。

    對非單向流建強保護，如B級服務好、C級、D級以上的凈化房間流動性，測試應在凈化空調系統(tǒng)正常運行不少于30分鐘開始效高化。

4.3.3采樣點數(shù)目及其布置:

采樣點數(shù)目下限值:沉降菌的采樣點數(shù)下限值可按表1確定。在滿足*少測點數(shù)的同時反應能力，不宜滿足*少培養(yǎng)皿數(shù)部署安排，見表2

表1 采樣點數(shù)下限值

表2 培養(yǎng)皿數(shù)下限值

    采樣點的布置:

    除受潔凈區(qū)的設備限制外，取樣點應在整個潔凈區(qū)均勻布置最新。

    在日常監(jiān)控時發揮重要作用，那些與產(chǎn)品相鄰近的區(qū)域，以及可能與產(chǎn)品直接接觸的空氣及設備附近應考慮增加取樣點和取樣次數(shù)(與產(chǎn)品非接觸區(qū)相比模樣，這些區(qū)域應視為關鍵區(qū)):人員活動頻繁或人員較集中的區(qū)域也應視為關鍵區(qū)取得顯著成效，需加強監(jiān)控。

    取樣點一股布置在趾離地面0.8-1.0m之間或操作平臺的高度數據顯示。

    取樣時責任，取樣沒備會對氣生干擾，取樣時應避免可能對氣流組織的干擾特征更加明顯。

    盡量避免在回風口附近取樣(距離lm以上)增多，且測試人員應在取樣口的下風側啟用，并盡量少走動。

4.3.4測試步驟：

4.3.4.1采樣方法:

    用無菌容器(如不銹鋼儲槽)將預先培養(yǎng)的培養(yǎng)皿(無菌平皿)帶至待測區(qū)，將培養(yǎng)皿取出活動上，放置在預先確定取樣點達到，打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露0.5小時大型，再將培養(yǎng)皿蓋上的可能性，蓋后倒置。檢測時記下培養(yǎng)皿打開的起始時間和結束時間不可缺少。

4.3.4.2培養(yǎng)：

全部采樣結束系列，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)明確相關要求。32℃培養(yǎng)，時間為72小時方案。

每批培養(yǎng)基應有對照試驗特點，檢查培養(yǎng)基本身是否污染，可每批選定三個培養(yǎng)皿做對照培養(yǎng)統籌發展。

4.3.4.3菌落計數(shù):

    用肉眼直接計數(shù)品質，然后用5-10倍放大鏡檢查，是否有遺漏慢體驗。若培養(yǎng)皿上有2個或2個以上菌落重疊深化涉外，可分辨時仍以2個或2個以上計數(shù)。

4.3.5注意事項：

    測試用具要做**處理製高點項目，以確保測試的可靠性的必然要求、正確性。

    采取一切措施防止人為對樣本的污染物聯與互聯。

    對培養(yǎng)基發展基礎、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細的記錄。

由于**種類繁多有很大提升空間，差別甚大要求，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細觀察，不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落認為，必要時用顯微鏡鑒別運行好。

    采樣前應仔細檢查每個培養(yǎng)皿的質量，如發(fā)現(xiàn)變質紮實、破損或污染的應剔除同期。

測試狀態(tài):

    沉降菌測試前，被測試潔凈區(qū)的溫濕度須達到規(guī)定的要求可能性更大，靜壓差必須控制在規(guī)定值內鍛造。

    沉降菌測試前，被測試潔凈區(qū)己經(jīng)過**使命責任。

    測試狀態(tài)有靜態(tài)和動態(tài)兩種共謀發展，在空調系統(tǒng)驗流時、長期停產(chǎn)恢復生產(chǎn)前持續創新、設施設備大修復產(chǎn)前進行靜態(tài)測試創造，在日常監(jiān)測時進行動態(tài)監(jiān)測。

    測試人員:測試人員必須穿戴符合環(huán)境的工作服分析。靜態(tài)測試時，室內測試人員不得多于2個人。

結果計算:

用計數(shù)方法得出各個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。

平均菌落數(shù)的汁算見下式:

計算公式：

M =（M1+M2+…+MN）/n

式中M為平均菌落數(shù)（CFU）

Mi表示1聽得懂，2推動，3，……n號平皿菌落數(shù)設備製造；n表示平皿總數(shù)基本情況。

6．標準：

7.結果評定:

    用平均菌落數(shù)判斷潔凈室的空氣中的微生物。

    潔凈區(qū)內的平均菌落數(shù)必須符合所選定的評定標準重要的。

    若某潔凈區(qū)的菌落數(shù)過評定標準品質，則必須對此區(qū)域先行**，然后重新測試兩次，測試結果必須合格能運用。

8.偏差糾正

    一旦發(fā)現(xiàn)空氣微生物監(jiān)測結果標，一般可以采取以下行動進行調查和評估:

GMP潔凈區(qū)沉降菌測試方法及測試記錄表